凝膠凈化定量濃縮系統是一種用于分離和定量大分子化合物的液相色譜技術。它主要基于樣品分子在多孔凝膠中的滲透性差異來實現分離。以下是
凝膠凈化定量濃縮系統工作原理的詳細解釋:
1、固定相:GPC的固定相是由多孔凝膠珠組成的,這些珠子具有不同的孔徑大小。當樣品溶液通過這些珠子時,大分子由于體積較大,不能進入小孔,因此沿較短的路徑流動;而小分子可以進入大部分或所有的孔,因此在柱中停留的時間更長。
2、移動相:移動相是液體溶劑,如四氫呋喃、二甲基甲酰胺或其他有機溶劑,用于推動樣品通過固定相。
3、分離機制:當樣品注入到GPC柱中時,大分子首先被洗脫出來,因為它們沿著較短的路徑流動。隨后,較小的分子逐漸被洗脫,因為它們在柱中的路徑較長。這樣,樣品中的分子按照其大小被分離。
4、檢測器:洗脫出的分子通常通過某種形式的檢測器進行檢測,如紫外-可見光譜檢測器、折射率檢測器或其他類型的檢測器。檢測器產生的信號與洗脫出的分子濃度成正比,從而允許對樣品中的組分進行定量分析。
5、數據解析:通過比較已知分子量的標品與樣品的洗脫時間,可以生成一個校準曲線。使用這個曲線,可以確定未知樣品中各組分的分子量。
6、濃縮系統:在某些應用中,可能需要對洗脫出的組分進行濃縮,以便進一步的分析或使用。這通常通過蒸發溶劑來實現,有時結合低溫來防止熱敏感樣品的降解。
總的來說,凝膠凈化定量濃縮系統利用了分子大小的差異來實現分離,并結合了檢測和數據處理技術來進行定量分析。這種技術廣泛應用于聚合物科學、生物化學和其他領域中,用于分析大分子的大小、分布和純度。